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技術(shù)文章

峰型異常問題解決

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  峰型問題是液相的主要問題,在做液相過程中,我們就是要變換不同的條件來改善不好的峰型,對于各種各樣的異常峰,要區(qū)別對待,從主要問題出發(fā),一個(gè)一個(gè)加以解決。
 
  1、色譜圖中未出峰。解決方法:系統(tǒng)未進(jìn)樣或樣品分解;泵未輸液或流動(dòng)相使用不正確;檢測器設(shè)置不正確;針對以上情況成因作相應(yīng)調(diào)整即可。
 
  2、一個(gè)峰或幾個(gè)峰是負(fù)峰。解決方法:流動(dòng)相吸收本底高;進(jìn)樣過程中進(jìn)入空氣;樣品組分的吸收低于流動(dòng)相。
 
  3、所有峰均為負(fù)峰。解決方法:信號(hào)電纜接反或檢測器輸出極性設(shè)置顛倒;光學(xué)裝置尚未達(dá)到平衡。
 
  4、所有峰均為寬峰。解決方法:系統(tǒng)未達(dá)到平衡;溶解樣品的溶劑極性比流動(dòng)相差很多;色譜柱尺寸及類型選擇不正確;色譜柱或保護(hù)柱被污染或柱效降低;溫度變化造成的影響。 
 
  5、所出峰比預(yù)想的小。解決方法:樣品黏度過大;進(jìn)樣品故障或進(jìn)樣體積誤差;檢測器設(shè)置不正確.定量環(huán)體積不正確;檢測池污染;檢測器燈出現(xiàn)問題。
 
  6、出現(xiàn)雙峰或肩峰。解決方法:進(jìn)樣量過大;樣品濃度過高;保護(hù)柱或色譜柱柱頭堵塞;保護(hù)拄或色譜柱污染或失效;柱塌陷或形成短通道。
 
  7、前伸峰。解決方法:進(jìn)樣量或樣品濃度高;溶解樣品的溶劑較流動(dòng)相極性強(qiáng);保護(hù)柱或色譜柱污染或失效。
 
  8、拖尾峰。解決方法:柱超載,降低樣品量;增加柱直徑采用較高容量的固定相;峰干擾,對樣品進(jìn)行清潔過濾;調(diào)整流動(dòng)相;硅羥基作用,加入三乙胺,用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度降低流動(dòng)相pH值;柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效,更換燒結(jié)不銹鋼;加在線過濾器,對樣品進(jìn)行過濾;死體積或柱外體積過大,將連接點(diǎn)降至最低;盡可能使用內(nèi)徑較細(xì)的連接管;柱效下降,更換柱子;采用保護(hù)柱,對柱子進(jìn)行再生。
 
  9、出現(xiàn)平頭峰。解決方法:檢測器設(shè)置不正確;進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高。
 
  10、出現(xiàn)鬼峰。解決方法:進(jìn)樣閥殘余峰,在每次進(jìn)完樣后用充足的時(shí)間來平衡和清洗系統(tǒng);樣品中存在未知物,改進(jìn)樣品的預(yù)處理;流動(dòng)相污染,更換新流動(dòng)相,盡可能現(xiàn)配現(xiàn)用,隔夜的流動(dòng)相再次使用時(shí)要過濾;盡可能使用HPLC級(jí)試劑;流路中有小的氣泡,打開Purge閥,加大流速排除。

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